EO（环氧乙烷）灭菌验证是无菌医疗器械等产品生产过程中的关键环节，核心是通过标准化周期测试，确认灭菌工艺能稳定达到预设的无菌保证水平（SAL），满足ISO 11135-2014、GB 18279.1-2015等标准要求。实际验证中，常通过短周期、半周期、全周期的逐步测试完成性能确认（PQ），三者循序渐进、各有侧重，其中用户提及的“分周期”实为行业通用的“短周期”，以下统一按规范术语界定各周期的定义及核心要点。

一、短周期（Fractional Cycle，用户提及“分周期”）

（一）定义

短周期是EO灭菌验证的前置性测试周期，指相较于预设的常规灭菌周期，刻意弱化灭菌条件（核心是缩短EO气体暴露时间），用于初步评价生物指示剂（BI）有效性、过程挑战装置（PCD）适用性，以及确认生物挑战装置与产品自身生物负载抗性关系的测试过程，是半周期、全周期验证的基础前提。

（二）核心要点

1. 实施目的：核心是验证生物挑战装置（含高抗性枯草杆菌黑色变种芽孢）的生物抗力是否满足要求，同时确认PCD能真实模拟产品最难灭菌位置的灭菌效果，为后续半周期、全周期的时间参数设定提供依据，避免后续验证出现无效测试。

2. 运行参数：灭菌温度、湿度、EO浓度等参数参照预设常规值，仅显著缩短EO暴露时间；预处理抽真空压强控制在-20~-50kPa，EO暴露过程压强维持在-10~30kPa，参数偏差需符合设备要求。

3. 检测要求：需同步进行产品无菌检测和生物指示剂培养，预期结果为外部过程挑战装置（EPCD）与内部过程挑战装置（IPCD）均有微生物复长，且二者抗性关系满足EPCD＞IPCD，同时产品无菌合格，以此证明生物挑战装置具有足够抗性，可用于后续验证。

4. 其他要求：生物挑战装置布放需均匀覆盖灭菌柜内温湿度最高点、最低点及最难灭菌位置，10m³以下灭菌柜每立方米布放3个，至少不低于5个；仅需运行1次，若未达到预期结果，需调整生物挑战装置或预处理条件后重新测试。

二、半周期（Half-Cycle）

（一）定义

半周期是EO灭菌微生物性能确认（MPQ）的核心环节，指在短周期验证合格的基础上，保持灭菌温度、湿度、EO浓度等关键参数不变，将EO暴露时间设定为预设常规灭菌时间的50%（或短周期基础上延长至合适时长），通过多轮重复测试，确认灭菌工艺在参数下限挑战下仍能实现完全灭菌的测试周期。

（二）核心要点

1. 实施目的：验证灭菌工艺的稳定性和可靠性，确认在灭菌时间缩短（下限参数挑战）的情况下，仍能将生物挑战装置中的微生物100%灭活，为全周期验证的时间参数提供核心依据，同时完成微生物性能确认的核心要求。

2. 运行参数：EO浓度控制在600~900g/m³，温度50~60℃，相对湿度50%~80%，参数偏差需符合±3℃（温度）、±10%（湿度）的要求；EO暴露时间为常规灭菌时间的一半，其他参数与短周期保持一致，重点开展参数下限挑战。

3. 检测要求：无需重复进行产品无菌检测（短周期已合格前提下），重点检测生物指示剂（EPCD、IPCD）培养结果，所有生物挑战装置必须呈阴性（无微生物复长），即实现100%杀灭，方可判定该周期合格。

4. 其他要求：至少连续运行3次，3次测试结果均需合格，若出现1次阳性，需排查参数偏差、生物挑战装置布放等问题，整改后重新开展3次完整测试；同时需同步记录各参数的运行稳定性，确保无异常波动。

三、全周期（Full-Cycle）

（一）定义

全周期是EO灭菌验证的最终确认环节，指在半周期验证合格的基础上，将EO暴露时间延长至半周期时间的2倍（即预设的常规灭菌时间），通过满载、参数上限挑战等测试，全面确认灭菌工艺对产品的适用性、参数稳定性，以及EO残留消除效果的完整测试周期，是灭菌工艺正式投入使用的核心依据。

（二）核心要点

1. 实施目的：全面验证灭菌工艺的综合有效性，包括参数上限挑战（如最高温度、最高EO浓度）、最小/满载适应性、重复灭菌对产品的影响，同时确认EO及二氯乙醇（ECH）残留的消除时间，确保灭菌后产品性能合格、残留达标，满足量产放行要求。

2. 运行参数：EO暴露时间至少为半周期的2倍（即常规灭菌时间）；可开展参数上限挑战（如温度、EO浓度上限）和最小装载测试，部分场景需进行二次灭菌测试；换气次数控制在3~5次，解析温度、堆码方式等需符合预设要求，确保残留有效消除。

3. 检测要求：核心包含三类检测：一是生物指示剂培养，所有EPCD、IPCD均需呈阴性；二是产品全性能检测，验证EO灭菌（强氧化性）对产品材料、性能无不良影响，符合产品技术标准；三是EO及ECH残留检测，确认解析时间后产品残留量符合国标要求，同时记录解析过程的温湿度、通风条件等参数。

4. 其他要求：至少运行1次满载全周期测试，若有特殊需求可增加至2~3次；需同步确认灭菌柜物理性能（如温湿度均匀性、EO加药量准确性，需采用2种以上方式验证）；验证合格后，相关参数可作为量产时的标准灭菌参数，后续需按规范开展年度再确认。

四、共性要点

1. 标准依据：所有周期验证均需严格遵循ISO 11135-2014、GB 18279.1-2015等标准要求，确保验证流程、检测方法、合格标准合规。

2. 人员要求：参与验证人员需经专业培训，熟练掌握EO理化特性、灭菌器操作、安全防护及相关法规标准，持证上岗。

3. 记录要求：各周期的运行参数、生物指示剂布放情况、检测结果、异常处理等信息需完整记录，形成可追溯的。

本文由广州佳誉医疗器械有限公司/佛山浩扬医疗器械有限公司联合编辑